高內(nèi)涵細(xì)胞成像系統(tǒng)的Z-stack層掃功能通過逐層掃描樣本的Z軸方向,獲取多層立體圖像信息,結(jié)合反卷積算法生成更清晰的單層圖像,有效解決厚組織或不平整樣本的成像難題,提升類器官、3D細(xì)胞模型等復(fù)雜結(jié)構(gòu)的研究精度。
一、技術(shù)原理與核心優(yōu)勢
1.逐層掃描與立體成像
Z-stack功能通過自動(dòng)對(duì)焦或手動(dòng)設(shè)置焦平面,在樣本的Z軸方向上逐層掃描(如每層間隔1-5μm),獲取多張不同焦平面的圖像。
例如,在類器官研究中,可掃描40層圖像(樣本厚度150μm),覆蓋整個(gè)三維結(jié)構(gòu),避免單層成像的信息丟失。
2.反卷積算法優(yōu)化圖像質(zhì)量
掃描后,系統(tǒng)通過反卷積算法對(duì)多層圖像進(jìn)行計(jì)算處理,消除離焦光干擾,生成比傳統(tǒng)單層圖像更清晰、細(xì)節(jié)更豐富的單層圖像。
例如,在腫瘤類器官研究中,Z-stack結(jié)合反卷積算法可清晰顯示活細(xì)胞與死細(xì)胞的邊界,提升藥物敏感性分析的準(zhǔn)確性。
3.解決厚組織成像難題
傳統(tǒng)成像技術(shù)受樣本厚度限制,易出現(xiàn)背景模糊或圖像失真。Z-stack功能通過分層掃描,結(jié)合智能對(duì)焦算法(如AI自學(xué)習(xí)對(duì)焦),可自動(dòng)識(shí)別最佳焦面,確保每層圖像的清晰度。
例如,在心血管研究中,Z-stack可對(duì)血管區(qū)域進(jìn)行多層掃描,獲得清晰圖像,而其他區(qū)域采用單層掃描以提高效率。
二、應(yīng)用場景與案例
1.類器官與3D細(xì)胞模型研究
案例:復(fù)旦大學(xué)華國強(qiáng)教授團(tuán)隊(duì)利用Z-stack成像技術(shù)與熒光標(biāo)記(如Calcein-AM)結(jié)合,建立類器官高通量成像和分析方法。通過掃描不同層中的3D類器官,結(jié)合反卷積算法,清晰顯示類器官的邊界和內(nèi)部結(jié)構(gòu),準(zhǔn)確評(píng)估藥物處理后的存活率。
優(yōu)勢:解決傳統(tǒng)成像技術(shù)難以捕捉類器官三維結(jié)構(gòu)的問題,提升藥物篩選的效率和準(zhǔn)確性。
2.腫瘤研究與藥物開發(fā)
案例:在腫瘤類器官化療敏感性測試中,Z-stack功能可捕獲化療前后類器官的形態(tài)變化(如直徑、存活率)。結(jié)合熒光標(biāo)記(如Calcein-AM/PI雙染色),清晰區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞,量化藥物效果。
優(yōu)勢:提供更全面的腫瘤細(xì)胞動(dòng)態(tài)信息,加速抗癌藥物研發(fā)。
3.神經(jīng)科學(xué)與組織工程
案例:在神經(jīng)突生長追蹤中,Z-stack功能可掃描神經(jīng)元的三維結(jié)構(gòu),結(jié)合分析軟件(如MetaXpress)量化神經(jīng)突長度、分支數(shù)等參數(shù)。
優(yōu)勢:支持長時(shí)間動(dòng)態(tài)監(jiān)測(如72小時(shí)連續(xù)成像),揭示神經(jīng)發(fā)育或退行性疾病機(jī)制。
三、系統(tǒng)擴(kuò)展性與兼容性
1.多模式成像支持
高內(nèi)涵細(xì)胞成像系統(tǒng)通常集成明場、熒光、共聚焦等多種成像模式,Z-stack功能可與這些模式結(jié)合,實(shí)現(xiàn)多參數(shù)分析。
例如,結(jié)合TissueFAXS系統(tǒng)的IF-IHC圖像轉(zhuǎn)換功能,Z-stack掃描的熒光圖像可轉(zhuǎn)換為免疫組化數(shù)據(jù),支持組織原位分析。
2.兼容多種樣本類型
Z-stack功能支持從微孔板到復(fù)雜生物模型(如器官芯片、斑馬魚)的觀測,兼容2倍-8倍不同尺寸的玻片。
例如,IXM-C系統(tǒng)可拍攝2D培養(yǎng)細(xì)胞、3D細(xì)胞球、類器官及小型模式動(dòng)物(如斑馬魚、線蟲)。
3.智能化數(shù)據(jù)分析
系統(tǒng)配備AI輔助分析模塊(如RDAU-Net模型),可自動(dòng)識(shí)別和分類細(xì)胞,量化形態(tài)學(xué)參數(shù)(如面積、圓度、軸向型)。
例如,在干細(xì)胞分化研究中,Z-stack掃描結(jié)合AI分析,可區(qū)分干細(xì)胞克隆團(tuán)與滋養(yǎng)層,檢測克隆團(tuán)內(nèi)陽性標(biāo)記物表達(dá)。